Siempre pienso y practicamos correspondiente al cambio de circunstancia y crecemos.Nuestro objetivo es lograr una mente y un cuerpo más ricos, así como la vida de los distribuidores mayoristas de kits preempaquetados de purificación de ácido nucleico de ARN viral magnético profesional.Esperamos poder tener fácilmente una asociación agradable con empresarios de todo el entorno.
Siempre pienso y practicamos correspondiente al cambio de circunstancia y crecemos.Nos proponemos el logro de una mente y un cuerpo más ricos, así como la vida paraReactivos universales de ADN de ARN de China y purificación automática de ácido nucleico, Aspiramos a satisfacer las demandas de nuestros clientes a nivel mundial.Nuestra gama de mercancías y servicios se amplía continuamente para satisfacer las necesidades de los clientes.¡Damos la bienvenida a clientes nuevos y antiguos de todos los ámbitos de la vida a contactarnos para futuras relaciones comerciales y lograr el éxito mutuo!
Manuales de instrucciones:

 Siempre pienso y practicamos correspondiente al cambio de circunstancia y crecemos.Nuestro objetivo es lograr una mente y un cuerpo más ricos, así como la vida de los distribuidores mayoristas de kits preempaquetados de purificación de ácido nucleico de ARN viral magnético profesional.Esperamos poder tener fácilmente una asociación agradable con empresarios de todo el entorno.
Distribuidores mayoristas deReactivos universales de ADN de ARN de China y purificación automática de ácido nucleico, Aspiramos a satisfacer las demandas de nuestros clientes a nivel mundial.Nuestra gama de mercancías y servicios se amplía continuamente para satisfacer las necesidades de los clientes.¡Damos la bienvenida a clientes nuevos y antiguos de todos los ámbitos de la vida a contactarnos para futuras relaciones comerciales y lograr el éxito mutuo!

Guía de análisis de problemas

El siguiente análisis de los problemas que puede encontrar enPlanta TotalRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

La columna de centrifugado está obstruida.

El bloqueo de la columna de centrifugación hará que el rendimiento de ARN se reduzca o incluso que no se pueda purificar para obtener ARN, y la calidad del ARN obtenido será baja.

Análisis de causa común:

1. La muestra no se rompe por completo.

La fragmentación incompleta de la muestra puede bloquear la columna de limpieza de ADN, lo que también puede afectar el rendimiento y la calidad del ARN.Recomendamos que al realizar la fragmentación de la muestra, triture rápidamente cantidades suficientes de nitrógeno líquido para romper los tejidos, como las paredes celulares y las membranas celulares de las muestras tanto como sea posible.Para muestras de plantas de polifenoles polisacáridos, le recomendamos que utilice Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

2. Aspire el sobrenadante aislado de la columna de limpieza de ADN, aspire el posible sedimento de restos celulares.

El sedimento de restos celulares aspirado puede obstruir la columna de solo ARN durante los procedimientos de adsorción de ARN (consulte el paso 5 del procedimiento, el paso 6 del procedimiento de polifenoles de polisacáridos).Recomendamos que se tenga cuidado al aspirar este sobrenadante para evitar que se aspiren restos celulares.

3. La cantidad inicial de muestra es demasiado grande.

El uso excesivo de la muestra dará como resultado una fragmentación incompleta de la muestra o una lisis incompleta de las células por parte del tampón PRL1 o el tampón PSL1, lo que provocará la obstrucción de la columna de purificación para las operaciones de purificación.Plant Total RNA Isolation Kit tiene un máximo inicial de 50 mg por purificación única de una muestra operada.Para muestras de plantas de polifenol polisacáridos, le recomendamos que pruebe el Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

4. La temperatura de la centrífuga es demasiado baja.

Aislamiento y purificación de ARN completo, excepto la alteración con nitrógeno líquido del tejido de la muestra, todos los pasos se realizan a temperatura ambiente (20-25 °C).Algunas centrífugas de baja temperatura tienen temperaturas inferiores a 20 °C, lo que puede causar bloqueos en la columna de limpieza de ADN y/o la columna de solo ARN.Si esto ocurre, ajuste la temperatura de la centrífuga a 20-25 °C y precaliente la mezcla de lisis y/o la adición de sobrenadante de separación de etanol a 37 °C.

No se extrajo ARN o el rendimiento de ARN es bajo

Por lo general, hay muchos factores que afectan la eficiencia de la recuperación, como: el contenido de ARN de la muestra, el método de operación, el volumen de elución, etc.

Análisis de las causas comunes de la siguiente manera:

1. Se realizó un baño de hielo o una centrifugación a baja temperatura (4 °C) durante la operación.

Sugerencia: Opere a temperatura ambiente (15-25°C) en todo el proceso, no haga baño de hielo ni centrifugación a baja temperatura.

       2.El ARN se ha degradado debido a una conservación inadecuada de la muestra oa una conservación a largo plazo de la muestra.

Recomendación: las muestras recién recolectadas deben congelarse rápidamente en nitrógeno líquido y luego almacenarse a -80 ° C durante mucho tiempo, evitar la congelación y descongelación repetidas de las muestras;o sumerja inmediatamente las muestras en solución RNAlater de estabilizador de ARN (muestras de animales).

       3.La fragmentación y la lisis insuficientes de la muestra conducen al bloqueo de la columna de purificación.

Sugerencia: Al triturar el tejido, asegúrese de que esté lo suficientemente triturado y transfiéralo rápidamente al tampón PSL1 preparado previamente (confirme que se haya agregado la proporción correcta de β-ME, consulte el paso 1 del procedimiento).

4.El eluyente se agregó incorrectamente.

Sugerencia: asegúrese de que ddH sin ARNasa₂El O se gotea en el medio de la membrana de la columna de purificación.

5. No se agregó el volumen correcto de etanol absoluto al tampón PSL2 o al tampón PRW2.

Sugerencia: siga las instrucciones, agregue el volumen correcto de etanol absoluto a Buffer PSL2 y Buffer PRW2 y mezcle bien antes de usar el kit.

6. La cantidad de muestra de tejido es inadecuada.

Sugerencia: Utilizar 50 mg de tejido por 500 μl de Buffer PSL1.El uso de demasiado tejido reducirá la cantidad de ARN extraído y también se reducirá la pureza del ARN resultante.Recomendamos encarecidamente que la dosis inicial de la muestra no supere los 50 mg por operación de extracción de ARN.

7. Volumen de elución inadecuado o elución incompleta.

Sugerencia: El volumen de eluyente de la columna de purificación es de 50-200 μl;si el efecto de elución no es satisfactorio, se recomienda prolongar el tiempo a temperatura ambiente después de añadir ddH sin ARNasa precalentado₂O, como 5-10min.

8. La columna de purificación tiene residuos de etanol después de lavar con Buffer PRW2.

   Sugerencia: si el tubo vacío se centrifuga durante 1 min y aún queda etanol después del lavado en el tampón PRW2, puede aumentar el tiempo de centrifugado del tubo vacío a 2 min o colocar la columna de purificación a temperatura ambiente durante 5 min para eliminar completamente el etanol residual.

9. El kit se utilizó incorrectamente.

   Sugerencia: para muestras de plantas de polisacáridos polifenólicos, es posible que no se puedan obtener muestras de ARN ideales si se usan kits comunes como el kit de aislamiento de ARN total de plantas.Le recomendamos que utilice Plant Total RNA IsolationKit Plus, que está especialmente diseñado para muestras de plantas de polisacáridos polifenólicos.Un kit especialmente desarrollado para la extracción de ARN de muestras vegetales de polifenoles y polisacáridos.

El valor OD260/OD280 es bajo

Elución de ARN con ddH₂O y se utiliza para las lecturas del espectrofotómetro da como resultado valores bajos de OD260/OD280.Recomendamos utilizar Tris-HCl 10 mM, pH 7,5 (en lugar de ddH sin ARNasa).₂O para eluir el ARN) para obtener valores de OD260/OD280 relativamente correctos, consulte “Ensayos de concentración y purificación de ARN” en la página 19.

El ARN purificado se degrada

La calidad del ARN purificado está relacionada con factores como la conservación de la muestra, la contaminación por ARNasa y la manipulación.

Análisis de causas comunes:

1. Las muestras de tejido no se almacenaron a tiempo después de la recolección.

    Recomendación: si las muestras de tejido no se usan a tiempo después de la recolección, guárdelas en nitrógeno líquido a baja temperatura inmediatamente o transfiéralas a -80 °C para almacenamiento a largo plazo después de congelarlas rápidamente en nitrógeno líquido, o sumerja inmediatamente las muestras en una solución estabilizadora de ARN RNAlater (muestras de animales).Para la extracción de ARN, intente utilizar muestras de tejido recién recolectadas.

2. Congelación y descongelación repetida de muestras de tejido.

   Sugerencia: cuando almacene muestras de tejido, es mejor cortarlas en pedazos pequeños para su conservación y sacar una parte de ellos cuando los use para evitar la degradación del ARN causada por la congelación y descongelación repetidas de las muestras.

3. Se introduce ARNasa en el quirófano o no se utilizan guantes desechables, mascarillas, etc.

   Sugerencia: los experimentos de extracción de ARN se realizan mejor en operaciones de ARN separadas, y la mesa del laboratorio debe limpiarse antes del experimento, y deben usarse guantes y máscaras desechables durante el experimento para evitar la degradación del ARN causada por la introducción de RNasa en la mayor medida posible.

4.El reactivo está contaminado por RNase durante el uso.

   Sugerencia: reemplazar con una nueva serie de kits de extracción de ARN total de plantas para experimentos relacionados.

5. Los tubos de centrífuga y las puntas de pipeta que se utilizan para manipular el ARN están contaminados con ARNasa.

Sugerencia: asegúrese de que los tubos de centrífuga, las puntas de las pipetas, las pipetas, etc. que se utilizan en la extracción de ARN no contengan ARNasa.

Manuales de instrucciones:

Manual de instrucciones del kit de aislamiento de ARN total de plantas