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Kit de aislamiento de ARN total de células Kits de purificación de aislamiento de ARN total de células

Descripción del equipo:

Se puede obtener ARN total altamente purificado y de alta calidad a partir de varias células cultivadas en 11 minutos.

Libre de ARNasa

Operado a temperatura ambiente (15-25 ℃)

Con columna de limpieza de ADN

Alto rendimiento de ARN

Rápido: terminar la extracción en 11 minutos

Seguridad: Ninguna Producto químico orgánico

fuerza foránea


  • :
  • Detalle del producto

    Etiquetas de productos

    Preguntas más frecuentes

    Descripción

    Este kit utiliza la columna de centrifugación y la fórmula desarrollada por Foregene, que puede extraer eficientemente ARN total de alta pureza y alta calidad de células cultivadas en placas de 96, 24, 12 y 6 pocillos.

    El kit proporciona una columna de limpieza de ADN eficiente, que puede separar fácilmente el sobrenadante y el lisado celular, unir y eliminar el ADN genómico.La operación es simple y ahorra tiempo..

    TLa columna solo de ARN puede unir eficientemente el ARN con una fórmula única.Se puede procesar una gran cantidad de muestras simultáneamente.

    Componentes del equipo

    Composición de la equipación RE-03111 RE-03114
    50 toneladas 200 toneladas
    Tampón cRL1* 25ml 100 ml
    Tampón cRL2 15 ml 60 ml
    Tampón RW1* 25ml 100 ml
    Tampón RW2 24ml 96 ml
    ddH2O sin ARNasa 10 ml 40 ml
    Columna de solo ARN 50 200
    Columna de limpieza de ADN 50 200
    Instrucción 1 1

    *Utilice guantes y tome medidas de protección durante la operación, ya que el tampón cRL1 y el tampón RW1 contienen sales caotrópicas irritantes.

    Características y ventajas

    ■ Todo el proceso se opera a temperatura ambiente (15-25℃), sin baño de hielo y centrifugación a baja temperatura.
    ■ Todo el kit está libre de ARNasa, no hay necesidad de preocuparse por la degradación del ARN.
    ■ La columna de limpieza de ADN se une específicamente al ADN, de modo que el kit puede eliminar la contaminación del ADN genómico sin agregar ADNasa adicional.
    ■ Alto rendimiento de ARN: la columna de solo ARN y la fórmula única pueden purificar el ARN de manera eficiente.
    ■ Velocidad rápida: fácil de operar y se puede completar en 11 minutos.
    ■ Seguridad: No se requiere ningún reactivo orgánico.
    ■ Alta calidad: el ARN purificado es de alta pureza, libre de proteínas y otras impurezas, y puede cumplir con varios experimentos posteriores.

    ventajas del kit de aislamiento de ARN foregene

    Aplicación de kits

    Es adecuado para la extracción y purificación de ARN total de células cultivadas en placas de 96, 24, 12 y 6 pocillos.

    flujo de trabajo

    ARN total celular

    Diagrama

    Flujo de trabajo del kit de aislamiento de ARN total de células1

    El diagrama de la batería de gel de agarosa del Cell Total RNA Isolation Kit trató los diferentes números de células anteriores, 20 μl de volumen de elución, tome 2 μl de ARN total purificado al 1 %.

    Almacenamiento y vida útil

    El kit se puede almacenar durante 12 meses a temperatura ambiente (15–25 ℃) o entre 2 y 8 ℃ durante más tiempo (24 meses).

    El tampón cRL1 se puede almacenar a 4 ℃ durante 1 mes después de agregar 2-hidroxi-1-etanotiol (opcional).


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  • Próximo:

  • El ARN no se extrae o los rendimientos de ARN son bajos

    A menudo hay una variedad de factores que afectan la eficiencia de la recuperación, como: el contenido de ARN de la muestra de tejido, el método de operación, el volumen de elución, etc.

    1. Se realizó un baño de hielo o centrifugación criogénica (4 °C) durante la operación.

    Recomendación: Operar a temperatura ambiente (15-25°C) durante todo el proceso, no bañar en hielo y centrifugar a bajas temperaturas.

    2. Conservación inadecuada de la muestra o tiempo excesivo de almacenamiento de la muestra.

    Recomendación: almacene las muestras a -80 °C o congélelas en nitrógeno líquido y evite el uso repetido de congelación y descongelación;trate de usar tejido fresco o células cultivadas para la extracción de ARN.

    3. Lisis de muestra insuficiente.

    Recomendación: Al homogeneizar tejido, asegúrese de que el tejido esté lo suficientemente homogeneizado y que las células del tejido estén suficientemente divididas para explicar la liberación de ARN.

    4. El eluyente no se agrega correctamente.

    Recomendación: Confirme que ddH libre de ARNasa2El O se agrega gota a gota en el centro de la membrana de la columna de purificación.

    5. No se agregó el volumen correcto de etanol absoluto al tampón RL2 o al tampón RW2.

    Recomendación: Siga las instrucciones, agregue el volumen correcto de etanol absoluto a Buffer RL2 y Buffer RW2 y mezcle bien antes de usar el kit.

    6. La dosificación de la muestra de tejido no es adecuada.

    Recomendación: Usar 10-20 mg de tejido o (1-5) × 106células por 500 μl de tampón RL1, ya que el uso excesivo de tejido puede resultar en una reducción de la extracción de ARN.

    7. Volumen de elución inadecuado o elución incompleta.

    Recomendación: El volumen de elución de la columna de purificación es de 50-200 μl;si el efecto de elución no es satisfactorio, se recomienda extender el tiempo de colocación a temperatura ambiente después de agregar ddH sin ARNasa precalentado2O, por ejemplo, durante 5-10 min.

    8. La columna de purificación tiene residuos de etanol después del lavado con el tampón RW2.

    Recomendación: si hay residuos de etanol después del lavado con el tampón RW2, centrifugar el tubo vacío durante 1 minuto, el tiempo de la operación de centrifugado del tubo vacío se puede aumentar a 2 minutos o la columna de purificación se puede colocar a temperatura ambiente durante 5 minutos para eliminar adecuadamente el etanol residual.

    El ARN purificado se degrada

    La calidad del ARN purificado está relacionada con factores como la conservación de la muestra, la contaminación por RNasa, la manipulación, etc.

    1. Las muestras de tejido no se conservan a tiempo.

    Recomendación: si las muestras de tejido o las células no se utilizan de manera oportuna después de la recolección, criopreservar inmediatamente a -80 °C o nitrógeno líquido.Para extraer el ARN, utilice una muestra de tejido o de células recién extraída siempre que sea posible.

    2. Congelación-descongelación repetida de muestras de tejido.

    Recomendación: cuando almacene muestras de tejido, es mejor cortarlas en trozos pequeños para su conservación y quitar una de las piezas cuando las utilice para evitar la congelación y descongelación repetidas de la muestra y la degradación del ARN.

    3. Se introduce RNasa o no se usan guantes desechables, mascarillas, etc. durante la operación.

    Recomendación: los experimentos de extracción de ARN se realizan mejor en salas de manipulación de ARN separadas y la mesa se limpia antes del experimento.

    Use guantes y máscaras desechables durante el experimento para minimizar la degradación del ARN causada por la introducción de RNasa.

    4. Los reactivos se contaminan con RNasa durante el uso.

    Recomendación: reemplazar con un nuevo kit de aislamiento de ARN total animal para experimentos relacionados.

    5. Los tubos de centrífuga, las puntas, etc. que se utilizan en la manipulación del ARN están contaminados con ARNasa.

    Recomendación: Confirme que los tubos de centrífuga, las puntas, las pipetas, etc. utilizados en la extracción de ARN estén libres de ARNasa.

    El ARN obtenido purificado afecta a los experimentos posteriores

    El ARN purificado por la columna de purificación, si los iones de sal, el contenido de proteína es demasiado grande afectará el experimento posterior, como: transcripción inversa, Northern Blot et al.

    1. El ARN eluido tiene residuos de iones de sal.

    Recomendación: Confirme que se haya agregado el volumen correcto de etanol al Buffer RW2 y realice 2 lavados de columna de purificación a la velocidad centrífuga indicada para la operación;si hay algún residuo de iones de sal, deje la columna de purificación en Buffer RW2 durante 5 min a temperatura ambiente y realice la centrifugación para maximizar la eliminación de la contaminación por sal.

    2. Residuo de etanol en ARN eluido.

    Recomendación: Confirmar que después del lavado con tampón RW2, realice la operación de centrifugado de tubos vacíos a la velocidad de centrifugado indicada para la operación, aumente el tiempo de la operación de centrifugado de tubos vacíos a 2 min si todavía hay residuos de etanol o déjelo a temperatura ambiente durante 5 m

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