Kit de PCR directo de tejido animal-UNG (sin herramientas de muestreo) Protocolo
Descripción del equipo:
Utilice directamente el lisado de tejido animal como plantilla para la amplificación por PCR, sin extracción separada de ADN, rápida y de alta sensibilidad.Añadido sistema anticontaminación UNG para eliminar falsos positivos.
◮No se requiere una purificación de ADN costosa y que requiere mucho tiempo.
◮La demanda de muestra es pequeña, solo toma una sola semilla.
◮No se requieren tratamientos especiales como molienda y trituración, y la operación es simple.
◮El sistema de PCR optimizado permite que la PCR tenga una mayor especificidad y una mayor tolerancia a los inhibidores de la reacción de la PCR.
Descripciones
Este kit utiliza un sistema de tampón de lisis único para liberar rápidamente ADN genómico de muestras de tejido animal para reacciones de PCR, por lo que es especialmente adecuado para pruebas genéticas a gran escala.
El proceso de liberación de ADN genómico del tampón de lisis se completa en 10 a 30 minutos a 65 °C.No se requieren otros procesos, como la eliminación de proteínas y ARN, y las trazas de ADN liberadas se pueden usar como plantilla para la reacción de PCR.
2×PCR FácilTMMix (UNG) utiliza dUTP en lugar de dTTP sobre la base de 2×PCR EasyTMMezcle y agregue la enzima UNG (uracil-N-glicosilasa) que puede degradar la plantilla que contiene dUTP al mismo tiempo.Antes de la reacción de PCR, la enzima UNG se usa para degradar el producto de PCR que contiene uracilo.La enzima UNG no tendrá ningún efecto sobre la plantilla que no contiene uracilo, lo que garantiza la especificidad y la precisión de la amplificación y evita la posibilidad de contaminación de los productos de PCR durante las pruebas genéticas a gran escala.
La ADN polimerasa D-Taq es una ADN polimerasa especialmente desarrollada por Foregene para reacciones de PCR directas.La polimerasa de ADN D-Taq tiene una gran tolerancia a una variedad de inhibidores de la reacción de PCR y puede amplificar de manera eficiente pequeñas cantidades de ADN en varios sistemas de reacción complejos, y la velocidad de amplificación puede alcanzar los 2 Kb/min, lo que es especialmente adecuado para la reacción de PCR directa.
Componentes del equipo
| Parte I | Tampón AL |
| proteasa foránea | |
| Tampón de carga de ADN 6× | |
| Parte II | 2×PCR FácilTMMezclar (UNG) |
Características y ventajas
■Sin purificación de ADN costosa y que requiere mucho tiempo
■ La demanda de muestras es pequeña, se pueden analizar tan solo 5 mg de tejido animal.
■ No se requiere ningún tratamiento especial, como trituración y trituración, y la operación es simple.
■ El sistema de PCR optimizado hace que la PCR tenga una mayor especificidad y una mayor tolerancia a los inhibidores de la reacción de la PCR.
■ Sistema PCR anticontaminación 2×PCR FácilTMMix (UNG) elimina eficazmente la contaminación causada por los productos de PCR y garantiza la especificidad y precisión de la amplificación.
Parámetros del equipo
Aplicación: una variedad de tejidos animales.
ADN liberado de la lisis de la muestra: solo se utiliza como plantilla de PCR.
El kit se puede utilizar para los siguientes fines: identificación de transgenosis, genotipado animal, etc.
flujo de trabajo
Almacenamiento y vida útil
La Parte I de este kit debe almacenarse entre 2 y 8℃.
El reactivo Buffer AL se puede almacenar durante 12 meses en condiciones secas;se puede almacenar en 2-8℃para un almacenamiento más prolongado.
El reactivo Foregene Protease tiene una fórmula única.Para garantizar su actividad y estabilidad, guárdelo a 4℃por 12 meses
Reactivo 6×El tampón de carga de ADN se puede almacenar a 4℃o -20℃por mucho tiempo.
La Parte II de este kit debe almacenarse a -20℃.
Reactivo 2×PCR FácilTMMix(UNG), si se usa con frecuencia, también se puede guardar a 4℃para el almacenamiento a corto plazo (agotar dentro de los 10 días).
