La enzima Taq de arranque en caliente se usa ampliamente.En comparación con la ADN polimerasa ordinaria, la enzima Taq de inicio en caliente puede evitar de manera efectiva algunas amplificaciones no específicas y la formación de dímeros de cebadores, y puede mejorar de manera efectiva la tasa de éxito de la amplificación del gen objetivo.Especialmente en el campo de las pruebas genéticas, la enzima Taq de arranque en caliente se ha identificado como un estándar obligatorio en la industria, y no se debe usar la polimerasa de ADN común.Como puede verse a partir de lo anterior, las enzimas Taq de arranque en caliente se usan ampliamente.En la actualidad, hay muchas marcas de enzimas Taq de arranque en caliente en el mercado nacional, pero no hay muchas enzimas Taq de arranque en caliente de alta calidad.Frente a tantos productos de enzimas Taq de inicio en caliente, ¿cómo debemos elegir?

1. Seleccione la enzima Taq de arranque en caliente con alta eficiencia de amplificación

La eficacia de la amplificación por PCR está estrechamente relacionada con el rendimiento de la enzima Taq.Después de optimizar un buen sistema de reacción de la enzima Taq, la eficiencia de amplificación es superior al 95% y el rango de amplificación de la cantidad de plantilla inicial es amplio.Se puede obtener una amplificación satisfactoria cuando el contenido del gen objetivo es bajo y no es fácil envenenarse cuando la cantidad de plantilla es alta y el período de amplificación exponencial es largo.Para la enzima Taq con bajo rendimiento, incluso si el sistema de reacción se ha optimizado muchas veces, la eficiencia de amplificación sigue siendo inferior al 90 %, la forma de "S" de la curva de amplificación no es obvia, la pendiente es pequeña y la curva es plana.Cuando la cantidad de plantilla es baja, no se puede amplificar, y cuando la cantidad de plantilla es alta, el efecto de amplificación no es ideal.Por lo tanto, la selección de ADN polimerasas con alta eficiencia de amplificación es crucial para el éxito de la PCR y la qPCR.

2. Seleccione la enzima Taq de inicio en caliente con un fuerte poder enzimático

El poder enzimático de la enzima Taq está relacionado con la eficiencia de amplificación.En general, cuanto más fuerte es el poder enzimático de la enzima Taq de arranque en caliente, más largo es el período de crecimiento exponencial de la amplificación por PCR, más típica es la curva en forma de S, más alto es el valor de la señal de fluorescencia y más adecuado para la detección por PCR multiplex.Las polimerasas de ADN de marca con un poder enzimático débil generalmente solo pueden admitir reacciones de 2 plex.Cuando se realizan reacciones de 3 plex, la curva de amplificación es baja, el valor de la señal de fluorescencia es bajo y no hay una curva de amplificación típica, por lo que los resultados son difíciles de juzgar.

3. Seleccione una enzima Taq de arranque en caliente con alta sensibilidad

En términos generales, la ADN polimerasa tiene una alta eficiencia de amplificación y una alta sensibilidad, pero también hay inconsistencias.Si la abundancia de genes objetivo de la muestra que se va a amplificar es baja, se recomienda probar la sensibilidad de amplificación de la enzima Taq.El método de detección más común es llevar a cabo una dilución de gradiente de 10 o 5 veces del fragmento del plásmido del gen objetivo, llevar a cabo la detección por PCR a la dilución más baja y seleccionar la enzima Taq de arranque en caliente con mayor sensibilidad de detección.

De lo anterior se puede ver que los investigadores deben elegir de acuerdo con sus propios requisitos experimentales y condiciones de financiación.Lo mejor es hacer un experimento de amplificación por dilución en gradiente para detectar la eficiencia de amplificación y la sensibilidad de la enzima Taq de arranque en caliente.

Un ejemplo de Foregene's ADN polimerasa Taq:

Foreasy HS Taq ADN polimerasa

Descripción

La ADN polimerasa Foreasy HS Taq es una ADN polimerasa expresada en bacterias de ingeniería de Escherichia coli mediante tecnología de recombinación de genes.La enzima se combina con un tampón de reacción único, que hace que el producto sea altamente resistente y compatible, y puede usar directamente el lisado de la muestra (sistema Foregene Lysis) como plantilla para las reacciones de detección.

Solicitud

Detección por PCR cualitativa y PCR cuantitativa de plantillas purificadas y plantillas no purificadas.

Control de calidad

1. No se detectó actividad de nucleasa exógena

2.Método de PCR para detectar ADN genómico residual sin huésped

3. Puede amplificar eficazmente genes de una sola copia en el genoma humano

4. Almacenar a temperatura ambiente durante una semana, sin cambios de actividad obvios.

Detalles del producto: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/