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¿Cuáles son las diferencias entre PCR, RT-PCR, qPCR y RT-qPCR?
La PCR es un método utilizado para amplificar ADN a partir de una pequeña cantidad de plantilla de ADN.La RT-PCR utiliza la transcripción inversa para producir una plantilla de ADN a partir de una fuente de ARN que luego puede amplificarse.La PCR y la RT-PCR suelen ser reacciones de punto final, mientras que la qPCR y la RT-qPCR utilizan la cinética de la velocidad de síntesis del producto...Leer más -
La vanguardia del descubrimiento de fármacos: apuntar al ARN con moléculas pequeñas
La vacuna de ARNm de Pfizer para la COVID ha reavivado la pasión por utilizar el ácido ribonucleico (ARN) como objetivo terapéutico.Sin embargo, apuntar al ARN con moléculas pequeñas es un gran desafío.El ARN solo tiene cuatro componentes básicos: adenina (A), citosina (C), guanina (G) y uracilo (U), que reemplaza a la timina...Leer más -
¿Qué son los medicamentos de ácido nucleico?
Las “drogas de ácido nucleico” utilizan “ácido nucleico”, que se refiere a sustancias como el ADN y el ARN que controlan la información genética, como drogas.Estos permiten apuntar a moléculas como ARNm y miARN que no pueden atacarse con fármacos tradicionales de bajo peso molecular y fármacos de anticuerpos, y existe una g...Leer más -
Alguna experiencia sobre siRNA en RT-PCR
1. Conocimientos básicos (si desea ver la parte experimental, transfiera directamente a la segunda parte) Como reacción derivada de la PCR convencional, la PCR en tiempo real monitorea principalmente el cambio de la cantidad de producto de amplificación en cada ciclo de amplificación por PCR. reacción en tiempo real tr...Leer más -
Resumen detallado del método de optimización del sistema de reacción experimental RT-PCR
一、Aumentar la sensibilidad del sistema de reacción: 1. Aislar ARN de alta calidad: La síntesis exitosa de ADNc proviene de ARN de alta calidad.El ARN de alta calidad debe ser al menos completo y estar libre de inhibidores de la transcriptasa inversa como EDTA o SDS.La calidad del ARN determina la máxima a...Leer más -
Diseño completo del cebador de PCR y detalles de la PCR
Base del diseño de la cartilla (el 99% de los problemas se pueden resolver) 1. Longitud de la cartilla: el libro de texto requiere entre 15 y 30 pb, generalmente alrededor de 20 pb.Es mejor que la condición real sea de 18 a 24 pb para garantizar la especificidad, pero cuanto más tiempo mejor, un cebador demasiado largo también reducirá la especificidad y reducirá el rendimiento.2. Primi...Leer más -
Precauciones para qRT-PCR compiladas minuciosamente por un médico senior
Todo el mundo habla sobre el principio del experimento qRT-PCR, el diseño del cebador, la interpretación de los resultados, etc., pero creo que debería compartir con ustedes el funcionamiento experimental de qRT-PCR.Es pequeño, pero se trata de resultados.Antes de realizar qRT-PCR, debemos tener una comprensión clara de nuestro...Leer más -
Precauciones para RT-qPCR
El experimento RT-qPCR incluye extracción de ARN y evaluación de calidad, transcripción inversa y qPCR en tres pasos, cada paso tiene muchas precauciones, que presentaremos en detalle a continuación.Ⅰ.Evaluación de la calidad del ARN En el experimento RT-qPCR, después de completar la extracción del ARN,...Leer más -
Una introducción completa a la PCR en tiempo real
1. Comprensión inicial En esta etapa, debemos comprender algunos conceptos y terminología para evitar cometer errores frente a nuestros mayores, como por ejemplo: P: ¿Cuál es la diferencia entre RT-PCR, qPCR, PCR en tiempo real, y RT-PCR en tiempo real?Respuesta: RT-PCR es una PCR de transcripción inversa (t...Leer más -
PCR, PCR múltiple, PCR in situ, PCR inversa, RT-PCR, qPCR（1）– PCR
PCR, PCR múltiple, PCR in situ, PCR inversa, RT-PCR, qPCR（1）– PCR Clasificaremos los conceptos, pasos y detalles de varios PCR Ⅰ.La reacción en cadena de la polimerasa PCR, conocida como PCR, es una tecnología de biología molecular que se utiliza para agrandar fragmentos de ADN específicos.Se puede considerar un...Leer más -
Principio experimental de qRT-PCR
RT-qPCR se desarrolla a partir de tecnología de PCR ordinaria.Agrega productos químicos fluorescentes (tintes fluorescentes o sondas fluorescentes) al sistema de reacción de PCR tradicional y detecta el proceso de recocido y extensión de la PCR en tiempo real según sus diferentes mecanismos luminiscentes.Señalización fluorescente...Leer más -
Resumen detallado del método de optimización del sistema de reacción experimental RT-PCR
Ⅰ.Aumente la sensibilidad del sistema de reacción: 1. Separe el ARN de alta calidad: la síntesis exitosa de ADNc proviene del ARN de alta calidad.El ARN de alta calidad debe garantizar al menos una duración total más larga y no contiene inhibidores que no contengan enzimas registradoras, como EDTA o SDS.La cal...Leer más
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