Kit de aislamiento de ADN y ARN viral Kits de preparación de purificación de extracción de ADN y ARN viral
Especificaciones
50 preparaciones, 200 preparaciones
El kit de aislamiento de extracción y purificación de ácido nucleico de ARN viral utiliza la columna giratoria y la fórmula desarrollada por Foregene, que puede extraer eficientemente ARN viral de alta pureza y alta calidad de muestras como plasma, suero, fluidos corporales libres de células y sobrenadante de cultivo celular.El kit agrega específicamente acrilamida lineal, que puede capturar fácilmente pequeñas cantidades de ARN de las muestras.La columna de solo ARN puede unirse de manera eficiente al ARN.El kit puede procesar una gran cantidad de muestras al mismo tiempo.
Todo el kit no contiene ARNasa, por lo que el ARN purificado no se degradará.Buffer viRW1 y Buffer viRW2 pueden garantizar que el ácido nucleico viral obtenido esté libre de proteínas, nucleasas u otras impurezas, que pueden usarse directamente para experimentos de biología molecular posteriores.
Componentes del equipo
| Acrilamida lineal |
| Búfer DRL |
| Búfer RW1, Búfer RW2 |
| ddH sin ARNasa2O |
| Columna de ADN/ARN |
| Instrucciones |
Características y ventajas
■ Operación a temperatura ambiente (15-25℃) durante todo el proceso, sin baño de hielo y centrifugación a baja temperatura.
■ Kit completo sin ARNasa, sin necesidad de preocuparse por la degradación del ARN.
■ Alto rendimiento de ácido nucleico: la columna de solo ADN/ARN y la fórmula única pueden purificar eficientemente el ADN y el ARN.
■ Gran capacidad de procesamiento de muestras: se pueden procesar hasta 200 μl de muestras cada vez.
■ Velocidad rápida: fácil de operar y se puede completar en 20 minutos.
■ Seguridad: no se requiere ningún reactivo orgánico.
■ Alta calidad: los fragmentos de ARN purificados son de alta pureza, libres de proteínas y otras impurezas, y pueden satisfacer varias aplicaciones experimentales posteriores.
Aplicación de kits
Es adecuado para la extracción y purificación de ácido nucleico viral en muestras como plasma, suero, líquido corporal libre de células y sobrenadante de cultivo celular.
flujo de trabajo
Diagrama
Almacenamiento y vida útil
■ Este kit se puede almacenar durante 24 meses en condiciones secas a temperatura ambiente (15-25 ℃);si necesita almacenarse durante más tiempo, puede almacenarse entre 2 y 8 ℃.
■ La solución de acrilamida lineal se puede almacenar a temperatura ambiente durante 7 días;después de recibir el kit, sáquelo y guárdelo a -20°C.
■ Después de agregar Linear Acrylamide a Buffer DRL, se puede almacenar a 2-8 °C hasta por 48 h.Utilice la solución preparada.
Guía de análisis de problemas
El siguiente es un análisis de los problemas que se pueden encontrar en la extracción de ADN/ARN viral, con la esperanza de ser útil para sus experimentos.Además, para otros problemas experimentales o técnicos que no sean instrucciones de operación y análisis de problemas, contamos con soporte técnico dedicado para ayudarlo.Si tiene alguna necesidad, contáctenos: 028-83360257 o correo electrónico:
Tech@foregene.com.
Sin extracción de ácido nucleico o bajo rendimiento de ácido nucleico
Por lo general, hay muchos factores que afectan la eficiencia de la recuperación, como: el contenido de ácido nucleico de la muestra, el método de operación, el volumen de elución, etc.
Análisis de causas comunes:
1. Se realizó un baño de hielo o una centrifugación a baja temperatura (4 °C) durante el procedimiento.
Sugerencia: Operar a temperatura ambiente (15-25°C) durante todo el proceso, no bañar en hielo y centrifugar a baja temperatura.
2. La muestra se almacenó incorrectamente o se almacenó durante demasiado tiempo.
Recomendación: Almacene las muestras a -80 °C y evite la congelación y descongelación repetidas;intente usar muestras recién recolectadas para la extracción de ácido nucleico.
3. Lisis de muestra insuficiente.
Recomendación: asegúrese de que la muestra y la solución de trabajo de lisis se mezclen completamente y se incuben a temperatura ambiente (15-25 °C) durante 10 minutos.
4. Adición incorrecta de eluyente.
Sugerencia: asegúrese de agregar gota a gota ddH2O sin ARNasa en el centro de la membrana de la columna de purificación y no lo deje caer sobre el anillo de la columna de purificación.
5. No se agregó el volumen correcto de etanol absoluto al tampón RW2.
Sugerencia: Siga las instrucciones, agregue el volumen correcto de etanol absoluto al Buffer RW2 y mezcle bien antes de usar el kit.
6. Volumen de muestra inadecuado.
Sugerencia: se procesan 200 µl de muestra por cada 500 µl de Buffer DRL.El procesamiento excesivo de muestras dará como resultado un menor rendimiento de extracción de ácidos nucleicos.
7. Volumen de elución inadecuado o elución incompleta.
Recomendación: El volumen de eluyente de la columna de purificación es de 30-50 μl;si el efecto de elución no es satisfactorio, se recomienda extender el tiempo a temperatura ambiente después de agregar ddH2O sin ARNasa precalentada, como 5-10 min.
8. Queda etanol en la columna después de lavarla con el tampón RW2.
Sugerencia: si queda etanol después de la centrifugación con el tampón RW2 durante 2 minutos, la columna se puede colocar a temperatura ambiente durante 5 minutos después de la centrifugación para eliminar completamente el etanol residual.
El ácido nucleico purificado se degrada
La calidad del ácido nucleico purificado está relacionada con la conservación de la muestra, la contaminación por RNasa, el funcionamiento y otros factores.Análisis de causas comunes:
1. Las muestras recolectadas no fueron almacenadas a tiempo.
Sugerencia: si la muestra no se usa a tiempo después de la recolección, guárdela inmediatamente a -80 °C a baja temperatura.Para la extracción de ARN, intente utilizar muestras recién recolectadas.
2. Recoger muestras y congelar y descongelar repetidamente.
Sugerencia: Evite congelar y descongelar (no más de una vez) durante la recolección y almacenamiento de muestras, de lo contrario se reducirá el rendimiento de ácido nucleico.
3. Se introduce ARNasa en quirófano o no se utilizan guantes desechables, mascarillas, etc.
Recomendación: los experimentos de extracción de ARN se realizan mejor en una sala de operaciones de ARN separada, y la mesa de laboratorio debe limpiarse antes del experimento.
Use guantes y máscaras desechables durante el experimento para evitar la degradación del ARN causada por la introducción de RNasa en la mayor medida.
4. El reactivo se contaminó con RNasa durante su uso.
Recomendación: Reemplácelo con un nuevo kit de aislamiento de ADN/ARN viral para experimentos relacionados.
5. Los tubos de centrífuga y las puntas de pipeta que se utilizan para manipular el ARN están contaminados con ARNasa.
Sugerencia: asegúrese de que los tubos de centrífuga, las puntas de las pipetas, las pipetas, etc. que se utilizan para la extracción de ARN no contengan ARNasa.
El ácido nucleico purificado afecta a los experimentos posteriores
ADN y ARN purificados por la columna de purificación, si el contenido de iones de sal y proteínas es demasiado alto, afectará los experimentos posteriores, como: amplificación por PCR, transcripción inversa, etc.
1. El ADN y el ARN eluidos tienen iones de sal residuales.
Sugerencia: asegúrese de agregar el volumen correcto de etanol absoluto al tampón RW2 y lave la columna de purificación dos veces a la velocidad de centrifugación especificada en las instrucciones de funcionamiento;Realice la centrifugación para minimizar la contaminación por iones de sal.
2. El ADN y el ARN eluidos tienen residuos de etanol.
Sugerencia: Después de confirmar el lavado con Buffer RW2, realice una centrifugación en tubo vacío a la velocidad de centrifugación indicada en las instrucciones de funcionamiento;si todavía hay residuos de etanol, puede centrifugar el tubo vacío y luego colocarlo a temperatura ambiente durante 5 minutos para eliminar los residuos de etanol en la mayor medida posible.
Manuales de instrucciones:
Manual de instrucciones del kit de aislamiento de ADN y ARN viral
