QuickEasyᵀᴹ Kit de PCR en tiempo real-Taqman
Descripción del equipo:
◮El exclusivo sistema de optimización de PCR hace que 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman más compatible.
◮Hot-start Foregene HS Taq Polymerase tiene una mayor eficiencia de amplificación, una mayor sensibilidad de amplificación y una mayor especificidad de amplificación.
◮2 × Rápido FácilTMReal PCR Mix -Taqman utiliza un sistema único optimizado por Foregene para mejorar la sensibilidad y la especificidad de la detección de sonda específica de secuencia, que se puede utilizar para determinar el genotipado y la variación del número de copias y obtener resultados precisos.
◮Este producto viene con un tinte de referencia interno ROX, que se puede usar para eliminar el fondo de la señal y el error de señal entre pozos, lo cual es conveniente para que los clientes lo usen en diferentes tipos de instrumentos de PCR cuantitativos.
Descripciones
El 2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman proporcionado por QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman es un sistema de mezcla maestra de nueva generación diseñado para la reacción de amplificación de Real Time PCR utilizando sondas fluorescentes específicas.Su ADN polimerasa Foregene HS Taq central se basa en la modificación de anticuerpos, utilizada junto con el sistema de PCR optimizado de Foregene, tiene una mayor especificidad y eficiencia de amplificación.En comparación con la mezcla de PCR ordinaria, tiene una capacidad de amplificación más fuerte y una tasa de desajuste más baja.Se puede utilizar en la reacción de PCR cuantitativa de fluorescencia para reducir la amplificación no específica y mejorar la precisión de la PCR.Puede mejorar en gran medida la especificidad del producto y la sensibilidad de la reacción.Al mismo tiempo, se proporcionó ROX como colorante de referencia interno.
El rápido fácilTMReal Time PCR Kit-Taqman kit tiene un amplio alcance de aplicación a la cantidad de plantilla, y puede obtener una buena curva estándar en diferentes regiones cuantitativas, y puede cuantificar y detectar con precisión genes objetivo con buena repetibilidad y alta confianza.
Especificaciones
200 preparaciones,500 preparaciones,1000 preparaciones,2000 preparativos
Componentes del equipo
| RápidoFácilTMKit de PCR en tiempo real-Taqman(20lsistema) | ||||
| Contenido del kit | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 preparaciones | 500 preparaciones | 1000 preparaciones | 2000 preparativos | |
| 2×RápidoFácilTM RCP reales Mezcla-Taqmán | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
| 20×Tinte de referencia ROX | 200l | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
| ddH sin ADNasa2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20ml |
| SI TU | 1pedazo | 1pedazo | 1pedazo | 1pedazo |
Características y ventajas
■ El exclusivo sistema de optimización de PCR hace que 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman más compatible.
■ La polimerasa Taq HS de Foregene de arranque en caliente tiene una mayor eficiencia de amplificación, una mayor sensibilidad de amplificación y una mayor especificidad de amplificación.
■ 2× RápidoFácilTM Real PCR Mix -Taqman utiliza un sistema único optimizado por Foregene para mejorar la sensibilidad y la especificidad de la detección de sonda específica de secuencia, que se puede utilizar para determinar el genotipado y la variación del número de copias y obtener resultados precisos.
■ Este producto viene con un colorante de referencia interno ROX, que se puede usar para eliminar el fondo de la señal y el error de señal entre pocillos, lo cual es conveniente para que los clientes lo usen en diferentes tipos de instrumentos PCR cuantitativos.
Aplicación de kits
■ PCR cuantitativa de fluorescencia para análisis cuantitativo de plantillas;
■ Camplificación por PCR convencional;
■ Se puede utilizar para la detección de alelos.
Almacenamiento y vida útil
El kit debe almacenarse a -20°C en la oscuridad;si se usa con frecuencia, también se puede almacenar a 4°C por un corto período de tiempo (agotar en 10 días).
Principios de diseño de cebadores de PCR en tiempo real
Cebador directo y cebador inverso
Para la PCR en tiempo real, el diseño del cebador es muy importante.Los cebadores están relacionados con la especificidad y la eficiencia de la amplificación por PCR y se pueden diseñar con referencia a los siguientes principios:
Longitud del cebador: 18-30 pb.
Contenido de GC: 40-60%.
Valor Tm: El software de diseño de cebadores, como Primer 5, puede proporcionar el valor Tm del cebador.Los valores de Tm de los cebadores aguas arriba y aguas abajo deben ser lo más parecidos posible.También se puede utilizar la fórmula de cálculo de Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Cuando se realiza la PCR, generalmente se selecciona una temperatura por debajo del valor Tm del cebador de 5 °C como la temperatura de hibridación (el aumento correspondiente en la temperatura de hibridación puede aumentar la especificidad de la reacción de PCR).
Cebadores y productos de PCR:
La longitud del producto de amplificación por PCR del cebador de diseño es preferentemente de 100-150 pb.
Deben evitarse en la medida de lo posible las imprimaciones de diseño en el área estructural secundaria de la plantilla.
Evite la formación de 2 o más bases complementarias entre los extremos 3 'de los cebadores aguas arriba y aguas abajo.
La base terminal 3′ del cebador no puede estar presente con 3 G o C consecutivas adicionales.
Los cebadores en sí mismos no pueden tener estructuras complementarias, de lo contrario se formará una estructura de horquilla que afectará la amplificación por PCR.
ATCG debe distribuirse lo más uniformemente posible en la secuencia del cebador, y la base terminal 3 'debe evitarse como T.
Apéndice 1: Paquete complementario de componentes del kit Cell Direct RT-qPCR
1.Solución de lisis celular
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| Componentes del equipo (sistema de lisis de 24 pozos / pozo) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 toneladas | 500 toneladas | ||
| ParteI | Tampón CL | 20ml | 100ml |
| Proteasa Plus II de Foregene | 400 ul | 1 ml × 2 | |
| ST tampón | 1 ml × 2 | 10ml | |
| ParteII | Borrador de ADN | 400 ul | 1 ml × 2 |
2. Mezcla RT
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| Componentes del equipo (sistema de reacción de 20 μl) | DRT-01011-B1 |
| 200 toneladas | |
| 5 × mezcla directa de RT | 800 ul |
| ddH sin ARNasa2O | 1,7 ml × 2 |
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| Componentes del equipo (sistema de reacción de 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 toneladas | 1000 toneladas | |
| 2 × Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
| 50× Tinte de referencia ROX | 40 l | 200 l |
| ddH sin ARNasa2O | 1,7ml | 10ml |
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