El nacimiento de la PCR
PCR (reacción en cadena de la polimerasa)
Han pasado más de 30 años desde la invención de la reacción en cadena de la polimerasa.Durante más de 30 años, después de que numerosos académicos de todo el mundo continuaran complementando y mejorando, la tecnología PCR se ha convertido en el método de investigación básico más importante, utilizado con mayor frecuencia y más amplio en todo el campo de las ciencias biológicas.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR, etc., desarrollados sobre la base de la amplia aplicación de la tecnología de PCR tradicional, así como el recién surgido PCR digital (PCR digital), han enriquecido en gran medida los métodos de investigación de la mayoría de los investigadores científicos y acelerado en gran medida el proceso de desarrollo de las ciencias de la vida modernas, especialmente la biología molecular, ha hecho grandes contribuciones al estudio de la vida y la naturaleza de la humanidad en su conjunto.
Defectos de la tecnología PCR tradicional
Separación de ácidos nucleicos complejos yextracción:
★ Tecnología PCR tradicional: requerida
★ Tecnología derivada de PCR: requerida
★ Muestras de ADN y ARN: grandes diferencias, requisitos de operación difíciles
★ Peligros para el cuerpo: los reactivos tóxicos dañan el cuerpo
La tecnología PCR tradicional y la tecnología derivada tienen un requisito previo: separación y purificación de ácidos nucleicos.
Cualquier muestra biológica necesita pasar por una serie de procesamientos de muestras complicados y tediosos para obtener muestras de ácido nucleico que cumplan con los requisitos de la tecnología PCR.
La separación y extracción de ADN y ARN siempre ha sido una tarea básica que los investigadores científicos relevantes deben repetir todos los días.
Debido a las enormes diferencias entre muestras, los procesos de separación y extracción de ADN y ARN también son muy diferentes.Este trabajo requiere un alto nivel de competencia técnica para los operadores.Las técnicas tradicionales de separación y extracción requieren un contacto prolongado con algunos reactivos químicos altamente tóxicos.Causará daños irreversibles al cuerpo del operador, e incluso causará daños directos durante el experimento.
Al mismo tiempo, para aquellos que tienen una gran cantidad de muestras para estudiar, la separación y extracción de ácidos nucleicos es una tarea que requiere mucha mano de obra.
Los kits de extracción y aislamiento de ácido nucleico en el mercado ahora están maduros y hay muchas marcas, pero son más o menos iguales.Ya sea que se trate de un kit centrífugo de columna de membrana de gel de sílice o un kit de método de perlas magnéticas, lleva mucho tiempo y es costoso.Además del costo del kit, también existen requisitos especiales para el equipo de laboratorio.La estación de trabajo automatizada utilizada en el método de perlas magnéticas es un equipo muy típico de gran valor y gran escala, lo que supone un gasto enorme para el laboratorio.
En resumen
Antes de realizar experimentos de PCR, el pretratamiento de las muestras es un dolor de cabeza inevitable y constante para los investigadores.Cómo resolver este problema y si los experimentos de PCR se pueden realizar sin la separación y extracción de ácidos nucleicos siempre ha sido el pensamiento de la mayoría de los investigadores científicos y el personal de laboratorio clínico.
Solución de Foregene
Después de años de ardua investigación sobre la tecnología de PCR directa y los kits relacionados, Forgene superó con éxito muchos cuellos de botella y logró con éxito la PCR directa para muchos tipos de muestras diferentes con gran resistencia y adaptabilidad, lo que permitió a los investigadores deshacerse de la separación y extracción de ácidos nucleicos engorrosa y peligrosa.Esto reducirá en gran medida la intensidad de trabajo de todos, acelerará el proceso de experimentación y ahorrará costos de investigación y pruebas científicas.
Comprensión y conocimiento de Forgene de DirectPCR
Primero, la tecnología DirectPCR es una tecnología de PCR directa para varios tejidos de muestras biológicas.Bajo esta condición técnica, no hay necesidad de separar y extraer los ácidos nucleicos, y la muestra de tejido se usa directamente como objeto, y los cebadores del gen objetivo se agregan para la reacción de PCR.
En segundo lugar, la tecnología DirectPCR no es solo una tecnología de amplificación de plantilla de ADN tradicional, sino que también incluye PCR de transcripción inversa de plantilla de ARN.
En tercer lugar, la tecnología DirectPCR no solo realiza directamente reacciones de PCR cualitativas de rutina en muestras de tejido, sino que también incluye reacciones de qPCR en tiempo real, lo que requiere que el sistema de reacción tenga una gran capacidad para resistir la interferencia de la fluorescencia de fondo y antagonizar los extintores de fluorescencia endógenos.
En cuarto lugar, las muestras de tejido a las que se dirige la tecnología DirectPCR solo requieren la liberación de plantillas de ácido nucleico y no eliminan proteínas, polisacáridos, iones de sal, etc. que interfieren con la reacción de PCR.Esto requiere que la polimerasa de ácido nucleico y la PCR Mix en el sistema de reacción tengan una excelente antirreversibilidad y adaptabilidad, y puedan garantizar la actividad enzimática y la precisión de replicación en condiciones complejas.
En quinto lugar, las muestras de tejido a las que se dirige la tecnología DirectPCR no se han sometido a ningún tratamiento de enriquecimiento de ácido nucleico y la cantidad de plantilla es muy pequeña, lo que requiere una sensibilidad y una eficiencia de amplificación extremadamente altas del sistema de reacción.
Conclusión
La tecnología DirectPCR es uno de los desarrollos e innovaciones tecnológicas más importantes de los últimos 30 años desde el nacimiento de la tecnología PCR.Forgene ha sido y seguirá siendo un pionero e innovador de esta tecnología.
La perspectiva de aplicación de la tecnología DirectPCR es muy amplia.La mejora continua y la promoción de esta tecnología seguramente traerán cambios subversivos a la investigación científica y el trabajo de inspección.Esta es una revolución en la tecnología PCR.
Hora de publicación: 21-feb-2017
