¿Sigues usando Trizol para extraer ARN?
¡Dios mío, no dejes que me preocupe por tu salud!
Trizol está a punto de ser marginado, ¿no me digas que todavía estás en la oscuridad?
El componente principal del reactivo Trizol es el fenol, y también se agregan reactivos orgánicos como el cloroformo en la operación experimental.La exposición a largo plazo dañará su salud, especialmente el contacto directo con la piel puede causar quemaduras químicas graves y cicatrices permanentes.
En circunstancias normales, los socios del laboratorio solo pueden reducir los peligros si se arman por completo (usando batas de laboratorio, guantes y máscaras).
Y mi consejo para usted es: reemplace Trizol directamente para evitar daños desde la fuente.
1. El producto de primera generación de la extracción de ARN
Sale en 1987 (Reactivos Trizol)
ventaja:
Extracción más completa
Desventajas:
Se requieren reactivos tóxicos como el isotiocianato de guanidina-fenol-cloroformo;
Operación engorrosa;
Necesidad de usar ADNasa para eliminar la contaminación del ADN
2. El producto de segunda generación de extracción de ARN.
Sale en 1994 (QIAGEN RNeasy y la mayoría de los productos domésticos)
ventaja:
Se adopta el método centrífugo de columna, que es fácil de operar;
Desventaja:
Necesidad de centrifugar para eliminar los restos de tejido
Necesidad de usar ADNasa para eliminar la contaminación del ADN
3.El producto de tercera generación de la extracción de ARN
Saliendo en 2005 (QIAGEN RNeasy Plus y ForegeneProductos de la serie de purificación de ARN)
ventaja:
Use directamente la columna de eliminación de ADN para eliminar el ADN y los restos de tejido al mismo tiempo, ahorrando tiempo y esfuerzo;
Seguro y conveniente, no es necesario agregar una columna de filtro y DNasa para eliminar fácilmente las impurezas y evitar la contaminación del ADN
Veamos las diferencias operativas entre el producto de primera generación (Trizol), el producto de segunda generación (RNeasy) y el producto de tercera generación (Foregene) de extracción de ARN:
El funcionamiento de la figura es claro: el producto de tercera generación tiene ventajas evidentes
Solo tres palabras para describir: ¡fácil!¡Rápido!Seguridad
El gráfico PK de los resultados experimentales.paralos productos de extracción de ARN de primera, segunda y tercera generación:
La primera generación (1: Trizol)
La segunda generación (2:QIAGEN RNfácil)
La tercera generación (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)
Qué tipo de producto es bueno, lo sabrás por comparación.
ARN extraído con el kit de Foregene
No solo alta concentración sino también buena integridad.
2. Gráfico qPCR (gráfico de curva de amplificación)
La primera generación (Trizol)
La segunda generación (azul cielomedioQIAGEN RNeasy-, rojomedioQIAGEN RNfácil +)
La tercera generación (azul significa Foregene, verde significa QIAGEN RNeasy plus)
(Nota: el gráfico QIAGEN RNeasy de qPCR de segunda generación significa que el kit no agrega DNasa y no elimina la contaminación del ADN. Por lo tanto, el CT es más alto y el resultado no es preciso; QIAGEN RNeasy + significa que se agregó DNasa y se eliminó la contaminación del ADN, y el resultado es preciso)
Ya sea un electroforetograma o un gráfico de curva de amplificación de PCR cuantitativa, la calidad de los productos Foregene no es inferior a la de los productos extranjeros importados.
Hora de publicación: 16-jul-2021
