Introducción:
El ARN, nombre científico ácido ribonucleico, su abreviatura proviene de RiboNucleic Acid, es un tipo de ácido nucleico formado al conectar al menos decenas de ribonucleótidos a través de enlaces fosfodiéster.
La premisa de la exploración del ARN es extraer ARN total libre de contaminación, y el principio básico de la extracción de ARN se puede resumir aproximadamente de la siguiente manera:
1. Interrumpir las celdas primero
2. Luego eliminar las impurezas macromoleculares (proteínas, lípidos, ADN, etc.)
3. Finalmente, el ARN se precipita mientras se eliminan las sales y los solventes orgánicos y se purifica aún más el ARN.
Pasado y presente del método de extracción.
La primera generación del método de extracción de ARN es el método de precipitación TRIzol (los reactivos utilizados incluyen isotiocianato de guanidina, fenol, cloroformo, etc.) inventado por un abuelo llamado Piotr Chomczynski y su abuela Nicoletta Sacchi, porque esta invención permite la extracción de ARN rápida y fácil, desde entonces comenzó el auge de la investigación de ARN.
Más tarde, Grandpa vendió esta patente a Invitrogen, e Invitrogen promovió este método en el mundo y se convirtió en un método ampliamente utilizado.
Más tarde, Invitrogen fue adquirida por Thermo.
Producto representativo: reactivo TRIzol de Invitrogen
Sin embargo, el método de precipitación TRIzol requiere múltiples precipitaciones y extracción de ARN, y los reactivos utilizados son tóxicos y tardan mucho en funcionar.
Por lo tanto, surgió el método de purificación de enzimas en columna de segunda generación, que utiliza una membrana de gel de sílice como material de adsorción de ácido nucleico específico para maximizar la recuperación de ARN en la muestra mientras se eliminan otras impurezas.
El método de segunda generación simplifica la operación sobre la base de un rendimiento estable, reduce el factor de riesgo y mejora la eficiencia de la extracción de ARN.
Productos representativos: QIAGEN RNeasy y la mayoría de los productos domésticos
Sin embargo, los métodos de primera y segunda generación requieren el uso de ADNasa para eliminar la contaminación del ADN, lo que genera algunos inconvenientes para los experimentos posteriores posteriores.La ADNasa residual reducirá la eficiencia de la transcripción inversa y reducirá la síntesis de ADNc de primera cadena, lo que afectará la precisión de los resultados.
Por lo tanto, el método de extracción de tercera generación se optimiza sobre la base de la segunda generación.El experimento no necesita agregar enzimas y el ARN se puede obtener fácilmente con solo dos columnas.
Columna 1: Columna de limpieza de ADN para limpiar el ADN
Columna 2: la columna de solo ARN adsorbe y recupera específicamente el ARN
¡Una operación tan simple no solo ahorra tiempo, sino que también facilita la operación de experimentos posteriores!
Productos representativos: QIAGEN RNeasy Plus yForegeneProductos de la serie de purificación de ARN
(RNfácil Plus)
(de ForegeneKit de aislamiento de ARN total de plantas）
¡Dilo en voz baja!El kit de ARN de Foregene también presenta un borrador de RNasa súper fácil de usar, que puede eliminar por completo 400 μg de RNasa en la superficie sólida en 1 minuto, ¡sin agregar ninguna sustancia tóxica al cuerpo humano!
Foto1: Tabla de comparación de procesos operativos
Los productos de Foregene pueden completar la extracción de ARN en solo dos canciones, ¡no haga que otros se pongan celosos del progreso de su experimento!
Foto2:Eresultados experimentales Cuadro comparativo
La primera generación (1: TRIzol)
La segunda generación (2: RNeasy de QIAGEN)
La tercera generación (3: RNeasy plus de QIAGEN, 4: Foregene)
Foto3: gráfico qPCR (gráfico de curva de amplificación)
La primera generación (verde significa TRIzol -, rojo significa TRIzol +)
La segunda generación (azul cielo significa QIAGEN RNeasy-, rojo significa QIAGEN RNeasy +)
La tercera generación (azul significa QIAGEN RNeasy plus, verde significa Foregene)
(Nota: el gráfico de qPCR "-" indica que no se ha agregado DNasa y no se ha eliminado la contaminación de ADN. Por lo tanto, el CT es más alto y el resultado no es exacto; "+" indica que se ha agregado DNasa y se ha eliminado la contaminación de ADN, el resultado es preciso)
Cada actualización técnica significa que la operación del experimento se está desarrollando en una dirección más simple y fácil de usar.
Foregene tiene como objetivo ayudar a más investigadores científicos a ahorrar tiempo y costos experimentales, obtener resultados experimentales de alta calidad y crear conjuntamente logros de investigación científica más valiosos.
Hora de publicación: 09-jul-2021
