Lnc-RT Heroᵀᴹ I (con gDNase)(Super Premix para la síntesis de cDNA de primera cadena a partir de lncRNA)
Especificaciones
25×20μl Recetas, 50×20μl Recetas
Lnc-RT HeroTM I (con gDNase) es un sistema de transcripción inversa especialmente desarrollado para lncRNA para eliminar rápidamente la contaminación del ADN genómico.5×gDNase Mix puede eliminar rápidamente el genoma restante en el ARN a 42 °C durante 2 minutos, evitando efectivamente la interferencia del genoma en los resultados de la qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix contiene Foregene LncRNA Reverse Transcriptase especialmente desarrollada por Foregene, que es un nuevo tipo de transcriptasa inversa específicamente para lncRNA y otras plantillas de complejos de ARN largo, con mayor afinidad de ARN y mayor eficiencia de grabación inversa.El sistema optimizado hace que la tasa de transcripción inversa sea más rápida y puede transcribir fácilmente plantillas de ARN con un alto contenido de GC y una estructura secundaria compleja.La síntesis de la primera cadena de ADNc puede completarse a 42 °C en 15 minutos.
Componentes del equipo
| 5× Mezcla de gDNasa |
| 5× Mezcla L-RT HeroTM |
| ddH2O sin ARNasa |
| Instrucciones |
Características y ventajas
■Capacidad eficiente para eliminar gDNA, que puede eliminar gDNA en la plantilla en 2 minutos.
■ Puede revertir de manera eficiente la transcripción de lncRNA.Cuando el producto de transcripción inversa se somete a qPCR, el valor de Ct es más bajo que el del sistema de transcripción inversa convencional.
■ Eficiente sistema de transcripción inversa, solo se necesitan 15 minutos para completar la síntesis de la primera cadena de ADNc.
■ Plantillas complejas: las plantillas con un alto contenido de GC y una estructura secundaria compleja también se pueden invertir con gran eficacia.
■ Sistema de transcripción inversa de alta sensibilidad, las plantillas de nivel pg también pueden obtener ADNc de alta calidad.
■ El sistema de transcripción inversa tiene una alta estabilidad térmica, la temperatura de reacción óptima es de 42℃, y todavía tiene un buen rendimiento de transcripción inversa a 50℃.
Aplicación de kits
Análisis cuantitativo relativo de lncRNA.
Análisis cuantitativo absoluto de lncRNA.
Puede analizar trazas de ARN de forma rápida y precisa, como el virus de ARN.
Transcripción inversa de plantillas de ARN con alto contenido de GC o estructura secundaria compleja.
flujo de trabajo
Almacenamiento y vida útil
El kit debe almacenarse a -20°C. Almacene el producto en un refrigerador a temperatura constante a -20°C inmediatamente después de la recepción.Si las condiciones de almacenamiento son adecuadas, el producto no degradará ningún rendimiento durante el período de validez de 1 año.
Guía de análisis de problemas
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-amplificación específica
1. Diseño de imprimación irrazonable
Recomendación: Diseñar cebadores de acuerdo con los principios de diseño de cebadores.
2. Residuos del genoma.
Sugerencia: asegúrese de que el primer paso de la temperatura de reacción de eliminación de ADNg sea de 42 °C y que el tiempo de reacción también se pueda extender a 5 minutos.
Sin señal de amplificación por RT-qPCR
1. El ARN se degrada.
Recomendación: el material para la extracción de ARN debe ser lo más fresco posible y se debe utilizar ARN de alta calidad y pureza.
2. El ARN contiene inhibidores.
Recomendación: Los inhibidores de la transcripción inversa generalmente incluyen SDS, sales de guanidina, EDTA, etc. Se recomienda lavar el precipitado de ARN con etanol al 70 % para eliminar los inhibidores.
3. Problemas de diseño de imprimación.
Recomendación: De acuerdo con el principio de diseño de cebadores, rediseñe los cebadores para inspección.
La banda objetivo aparece en el control en blanco.
1. Contaminación de herramientas operativas o reactivos.
Recomendación: Todos los reactivos o equipos para el experimento deben esterilizarse en autoclave.Tenga cuidado y delicadeza al manipularlas para evitar que las muestras de ADN sean absorbidas por la pipeta o se derramen fuera del tubo de centrífuga.
2. Ocurrió contaminación durante la preparación del sistema de reacción de PCR.
Recomendación: Tomar las precauciones necesarias en su manipulación, tales como: usar guantes de látex, usar puntas con filtro.Utilice Real Time PCR Mix en un sistema a prueba de contaminación.
3. Los cebadores se degradan.
Sugerencia: use electroforesis SDS-PAGE para detectar si los cebadores están degradados y reemplácelos con nuevos cebadores para experimentos de detección de fluorescencia.
Manual de instrucciones:
