Kit ForeDirect RT-qPCR
Descripción
El kit ForeDirect RT-qPCR está diseñado para la amplificación directa en tiempo real de ARN de colecciones de hisopos sin procesos de purificación de ARN.Este kit completa los ciclos de qRT-PCR en una hora.La mezcla de enzimas es una combinación optimizada de transcriptasa inversa, ADN polimerasa Hot-Start Taq e inhibidor de ARNasa.El tampón de reacción contiene todos los componentes necesarios, incluidos los componentes de tampón optimizados, Mg2+, dUTP y dNTP.
Especificaciones
100T
Componentes del equipo
Agente de liberación de ácido nucleico |
protector de ARN |
2 × tampón RT-qPCR |
Mezcla de enzimas (Taq&M-MLV) |
Instrucciones |
Aplicación PCR
1. Una vez que los tubos de reacción de PCR se hayan centrifugado brevemente, colóquelos en el tanque de muestras del instrumento de amplificación.
2. Protocolo térmico
Paso | Temperatura | Tiempo | Ciclos | |
1 | Transcripción inversa | 50℃ | 15 minutos | 1 |
2 | Pre-desnaturalización | 95℃ | 1 minuto | 1 |
3 | desnaturalización | 95℃ | 10 segundos | 42 |
4 | Recocido/Extensión | 60℃ | 30 segundos |
Nota:La señal fluorescente se detectó inmediatamente después del paso de extensión de cada ciclo.
3. Después de configurar, guarde el archivo y ejecute el programa de reacción.
Pasos operativos
Antes de preparar los reactivos, todos los reactivos del kit deben descongelarse a temperatura ambiente y mezclarse suavemente.
Preparación de reactivos
1. Prepare la mezcla de liberación de ácido nucleico
Componente | Volumen por muestra o control |
Agente de liberación de ácido nucleico | 5μL |
protector de ARN | 0,5 l |
2. preparar la mezcla de reacción
Componente | Volumen por muestra o control |
2 × tampón RT-qPCR | 15 l |
Mezcla de enzimas (Taq&M-MLV) | 1,5 l |
Cebadores y sondas | 1μL |
Almacenamiento y vida útil
-El kit debe almacenarse a -20± 5℃.El período de validez es de 12 meses.
-Evitar ciclos repetidos de congelación-descongelación (<5 ciclos).